Inhoud
Studies met microbiële culturen vereisen vaak de identificatie van organismen die erin aanwezig zijn. Wanneer een klein deel van een cultuur wordt geïntroduceerd op agar die een voedingsmedium bevat, is het mogelijk om een massa bacteriën te scheiden in individuele kolonievormende eenheden. Elk van deze eenheden ontwikkelt zich in afzonderlijke kolonies, die kenmerken vertonen die helpen om het organisme te identificeren.
Doel
Microbiologische studies vereisen de studie van de morfologie van bepaalde organismen. In sommige gevallen moeten de organismen die in een gemengde cultuur aanwezig zijn, worden gescheiden voordat ze kunnen worden geanalyseerd. Het is dus belangrijk om deze microbiële kolonies te isoleren. Bacteriële culturen bevatten een groot aantal cellen in één druppel. Zaaien door uitputting op een agarplaat verdunt ze, zodat een enkele bacteriecel wordt afgezet in een specifiek gebied van de plaat. Verschillende van deze individuele cellen zijn tussen enkele millimeters van elkaar gescheiden. Elk van hen deelt zich om duizenden nieuwe cellen te vormen, waardoor geïsoleerde kolonies ontstaan.
Beginsel
De agarplaat levert een medium rijk aan voedingsstoffen dat de groei en vermenigvuldiging van micro-organismen stimuleert. Bij het zaaien van afvalwater wordt de kwadrantstrippingmethode gebruikt, waarbij de gehele plaat in vier kwadranten wordt verdeeld. Terwijl je van het ene kwadrant naar het andere gaat, is er een geleidelijke verdunning van de oorspronkelijke cultuur over het gehele beschikbare oppervlak. Het kwadrant waarin je begint, toont een dichte en niet-onderscheiden microbiële groei, die eruitziet als een tapijt van micro-organismen, terwijl de laatste geïsoleerde kolonies laat zien.
Materialen
Zaaien door uitputting vereist voedingsagarplaten, een lus voor inoculatie, bacteriekweek, een desinfecterende oplossing, zoals Lysol 10%, en een bunsenbrander. Je hebt ook veiligheidsuitrusting nodig, zoals een schort, handschoenen en een veiligheidsbril. Het inoculum voor de vorming van striae is gemaakt van de kweek van bacteriën met behulp van de lus en het krabben van de voedingsagarplaten. De bunsenbrander is voor het branden van het handvat tijdens groeven. Gebruik de desinfecterende oplossing om het oppervlak te reinigen voordat u met het experiment begint.
Methode
Gebruik een kleine hoeveelheid inoculum om in het eerste kwadrant heen en weer te zaaien. Vlam het handvat en laat het afkoelen, raak het aan op een deel van de agarplaat dat niet is geïnoculeerd. Raak het aan het ene uiteinde van het gebied dat u zojuist hebt gezaaid aan en strek het van daaruit naar het tweede kwadrant. Vlam en koel de lus opnieuw en bewerk vanuit het tweede gebied het derde kwadrant. Herhaal hetzelfde proces met het vierde kwadrant.
