Inhoud
De voor- en nadelen van de lichtmicroscoop hebben betrekking op licht, vergroting en resolutie. Lichtmicroscopen vergroten zichtbaar licht - een duidelijk voordeel, want dit is wat onze ogen kunnen zien. De vergroting (hoe groot een object lijkt) en resolutie (duidelijkheid van details) zijn echter beperkt bij gebruik van lichtmicroscopen.
Lichtbron
Lichtmicroscopen gebruiken ofwel een reflecterende spiegel of een elektrisch licht voor directe verlichting door het monster en in het lenssysteem. Spiegelsystemen zijn minder duur, maar vereisen voldoende omgevingslicht en meer geduld om aan te passen. Elektrische verlichtingssystemen zijn duurder en vereisen een stopcontact in de buurt, maar zijn eenvoudiger te gebruiken.
Licht intensiteit
Lichtintensiteit (helderheid) is belangrijk, aangezien licht door het monster gaat dat u bekijkt. Dun, doorschijnend monster (helder) kan het beste worden bekeken met licht van lage intensiteit, terwijl dikkere en ondoorzichtige monsters licht met een hogere intensiteit vereisen. Een nadeel van lichtmicroscopie is dat sommige monsters te dik of ondoorzichtig zijn om onder dit type microscoop te zien. Zeer dunne of doorschijnende monsters kunnen worden gekleurd om het contrast te vergroten voor een betere visualisatie. Dit proces zal echter levende exemplaren doden.
Lichtintensiteit aanpassen
Het diafragma, dat zich boven de lichtbron en onder het podium (monsterplatform) bevindt, past de hoeveelheid licht aan die door het preparaat gaat. Er zijn twee soorten diafragma's beschikbaar: een vaste diafragma-keuzeschakelaar en een instelbaar diafragma in camerastijl.
De vaste opening bestaat uit verschillende maten openingen op een roterende plaat. Het gewenste diafragma wordt geselecteerd door aan de draaiknop te draaien. Diafragma's met een vast diafragma zijn minder duur, maar bieden minder nauwkeurige controle over de lichtintensiteit.
Het instelbare diafragma biedt een continu variabele diafragmagrootte, net als de f-stop op een cameralens, en biedt dus een nauwkeurigere controle over de lichtintensiteit. Deze systemen zijn duurder.
Uitbreiding
Groter is niet altijd beter. Lichtmicroscopen kunnen objecten zeer goed vergroten tot 1000x (duizend keer groter dan het leven). Bovendien wordt het beeld steeds meer vervormd en waziger. Het vergroten van de grootte levert geen betere afbeelding op en maakt de afbeelding in feite onbruikbaar.
Met een vergroting tot 1000x zijn alle soorten levende organismen te zien, zelfs de kleinste bacteriecellen. Dit maakt lichtmicroscopie een krachtig hulpmiddel voor het bestuderen van celtypen, vijverwater, bodemmonsters en andere studies, waarbij een overzicht van micro-organismen gewenst is. Lichtmicroscopie is echter van weinig nut voor de studie van subcellulaire structuren, vanwege de resolutielimieten die inherent zijn aan het gebruik van licht.
Resolutie
Resolutie is een maatstaf voor de helderheid van goede details die in een afbeelding worden geproduceerd. Afbeeldingen met een lage resolutie zien er wazig of "wazig" uit. Afbeeldingen met een hoge resolutie zijn scherp, duidelijk en gedetailleerd. Het grootste nadeel van lichtmicroscopen is de resolutielimiet. Naast de 1000x vergroting verliezen lichtmicroscopen al snel het vermogen om kleine details te verfijnen. Dit vloeit voort uit de fysieke eigenschappen van het licht, niet de kwaliteit van het instrument. Voor een betere resolutie van details van subcellulaire structuren, moeten andere technologieën, zoals elektronenmicroscopen, worden gebruikt.
